Waters Styragel色谱柱的使用指南
本章介绍了:
■ 色谱指南
■ 色谱柱校准
a.色谱指南
凝胶渗透色谱柱的使用寿命有限,并且与其保养和使用状况直接相关。样品和洗脱剂的污染、频繁的溶剂更换、操作和储存方法不当以及温度循环都会缩短色谱柱寿命。
色谱柱使用指南
使用Waters Styragel色谱柱时,请遵守下列准则:
■ 为获得最佳的分离度和最长的色谱柱寿命,各色谱柱的流速不得超过1.0 mL/min或反压超过3.5 MPa(500 psi,35 atm,以系统反压作校正)。
■对于溶剂高效色谱柱,为获得最佳的分离度和最长的色谱柱寿命,各色谱柱的流速不得超过0.3 mL/min或反压超过3.5 MPa(500 psi,35 atm,以系统反压作校正)。这些色谱柱的正常流速为0.3 mL/min。
■ 对色谱柱采取适当保护,防止振动和机械冲击。
■ 最大限度减少温度循环。
■ 防止溶剂组分快速改变而引起的色谱柱压力迅速变化。
■ 更换为不同粘度的溶剂时,可能需要调节流速,从而使各色谱柱的反压低于操作反压指标3.5 MPa(500 psi,35 atm)。
■ 将样品溶解在流动相中,避免沉淀。
■ 请始终使用高质量的HPLC级溶剂。
■ 单个色谱柱最好用于特定应用。频繁切换样品和溶剂会加速色谱柱退化和分离度的下降。
b.色谱柱校准
只要更换了完整色谱柱组中的一根色谱柱,就应重新生成校准曲线,保证应用的重现性。图2、图3和图4显示了一系列色谱柱的典型校准曲线。此校准曲线由聚苯乙烯标准品获得。